Meca spesifik DNA probu kullanarak nehir suyunda MRSA izlenmesi

Download
2015
Ergene, Aysun
İçgen, Bülent
Staphylococcus aureus insan vücudu üzerinde sıklıkla asemptomatik olarak taşınan fırsatçı bir patojendir. Metisiline dirençli S. aureus (MRSA) sonradan edindikleri gen sayesinde metisilin ve genel olarak diğer tüm β-laktam antibiyotiklere karşı dirençlidir. MRSA dünyadayaygın bir patojen olup, diğer S. aureus enfeksiyonları ile karşılaştırıldığında MRSA enfeksiyonlarının daha yüksek oranda morbidite ve mortalite gösterdiği görülmektedir. Antibiyotikler ve diğer ilaçların doğal sularda ve yüzey sularında bulunması, nehirler gibi klinik olmayan ortamlarda yüksek direnç gösteren bakterilerin oluşmasına neden olmaktadır. Bunların içinden insanlar ve hayvanlar tarafından taşınan metisiline dirençli stafilokoklar ve β-laktam antibiyotiklere direnç sağlayan mecA geni taşıyan bakteriler özellikle dikkat çekmektedir. Metisiline dirençli stafilokokların yayılımlarındaki sürekli artışa rağmen, mecA genini taşıyan stafilokok ve diğer potansiyel patojen bakterileri rezervuar olarak barındıran doğal çevre hakkında çok az bilgi bulunmaktadır. Metisilin dirençli S. aureus penisilin bağlayıcı protein PBP2a içermesi ile oluşan hedef bölgelerin değiştirilmesi nedeniyle βlaktamlara karşı olan afinitesi azalmaktadır. Bu proteini kodlayan mecA geni mobil SCCmec olarak adlandırılan kromozom kaseti üzerinde yer almaktadır. Literatürde daha önce tarif edilmiş olan tüm SCCmec kasetindeki mec kompleks genleri (mecA, mecI, ve mecR1) genelde aynıdır. Bu genler β-laktam antibiyotiklere direnci sağlamaktadır. Ancak, tüm mecA klonları metisiline dirençli değildir ve MRSA populasyonundaki tüm direnç seviyeleri, çeşitli kromozomal faktörler tarafından module edilen PBP2a üretimindeki verimliliğe bağlıdır. Bu durum, MRSA direnç seviyelerinin fenotipik duyarlı ile yüksek dirençli arasında değişkenlik göstermesinin nedenini açıklamaktadır. Bu kaygılara dayanarak, bu projede şehirsel ve fekal kirlilikten etkilenen yüzey sularında mecA taşıyan bakterilerin izole edilmesi, tanımlanması, karakterizasyonu ve mecA spesifik DNA probları kullanarak mevsimsel olarak takip edilmesi planlanmıştır. Daha önce TÜBİTAK tarafından desteklenen 111T045 nolu proje kapsamında Kırıkkale il sınırları içerisinden geçen Kızılırmak’ın 12 farklı bölgesinden alınmış olan su örneklerinden metisilin dirençli bakteriler izole edilmiştir. Bu proje kapsamında ise, 111T045 nolu proje kapsamında izole edilen ve daha önceden stok kültürleri hazırlanmış olan bu bakterilerin tanımlanması, karakterize edilmesi, mecA genlerinin varlıklarının gösterilmesi planlanmış ve mecA spesifik DNA probları hazırlanarak 2011-2012 yılları süresince üçer aylık periyotlarla alınmış ve fikse edilmiş su örneklerinde mecA içeren bakterilerin mevsimsel olarak takip edilmesi planlanmıştır. Metisilin dirençli suşların tanımlanması 16S rRNA dizi iii analizi ve yağ asidi analizi ile yapılmıştır. Fikse edilmiş su örneklerindeki mecA geni taşıyan suşların populasyonlarındaki mevsimsel değişiklikler ise mecA hedefli floresan işaretli oligonükleotid problar kullanılarak floresan in situ hibridizasyon yöntemi ve görüntü analizi mikroskopu ile takip edilmiştir. Böylece mecA geninin S. aureus dışında başka bakterilerde de bulunup bulunmadığı ve mecA spesifik prob ile metisilin dirençli bakterilerin yüzey sularında takibinin yapılmasının uygunluğu belirlenmiştir. mecA hedefli floresan işaretli oligonükleotid problar kullanılarak floresan in situ hibridizasyon yöntemi ile metisilin dirençli bakterilerin yüzey sularında takip edilmesine yönelik literatürde herhangi bir çalışma bulunmamaktadır. Bu bakımdan projenin benzer konudaki çalışmalara da önemli katkıda bulunacağı düşünülmektedir.

Suggestions

Elucidation of the role of GCN2 gene in response to powdery mildew infection
Öztürk, İbrahim Kutay; Akkaya, Mahinur S.; Ersoy, Figen; Department of Biotechnology (2012)
Plant immune system is entirely based on the immunities of the individual cells in which systemic signals originate from the infection sites. Powdery mildew disease is one of the agents causing these infection sites, resulting in significant yield losses, if disease develops. Understanding the molecular basis of plant-pathogen interactions is the new trend for fighting against plant pathogens, since classical methods used in selection of resistant plants are becoming less and less efficient nowadays. Thus, ...
Development and analysis of controlled release polymeric rods containing vancomycin
Tağıt, Oya; Hasırcı, Vasıf Nejat; Department of Biotechnology (2005)
Antibiotic use is a vital method for the treatment of most diseases involving bacterial infections. Unfortunately, in certain cases these agents are not effective in treatments against diseases for either some limitation in antibiotic usage because of the side effects or some distribution problems caused by physiological or pathological barriers in the body. Such problems are thought to be minimized by development of controlled release systems which involve implantation of antibiotic loaded polymeric system...
Characterization and genomic analysis of a novel bacteriophage against methicillin-resistant staphylococcus aureus
Çotak, Medine; Akkaya, Mahinur S.; Karahan, Zeynep Ceren; Department of Biotechnology (2019)
Methicillin resistant Staphylococcus aureus (MRSA) is one of the most frequent hospital and community acquired infectious agents causing severe diseases. Bacteriophages may offer a solution to treat the bacterial infections that are not responding to classical antibiotics. In this context, a new lytic phage, named as vB_SauM-MikSA913, was isolated from sewage treatment center in Samsun (Turkey). MRSA clinical strains obtained from a local hospital were used as propagating hosts while searching for the lytic...
Investigation of plasmid mediated colistin resistance phenotypically and genotypically in Salmonella and E. coli isolates in Turkey
Tok, Seray; Soyer, Yeşim; Department of Food Engineering (2022-5-31)
Today, colistin is used as the last resort antimicrobial against Gram-negative bacteria. Excessive use of colistin caused resistance among bacteria. Recent studies showed presence of plasmid mediated mcr genes, encoding colistin resistance that can be transferred horizontally between different bacterial species. In this study, it was aimed to investigate colistin resistance and change in colistin resistance rate in E. coli and Salmonella isolates over time from different cities in Turkey. For this aim, we...
Antioxidant capacities of selected fruits and herbal teas consumed in regular diet and their antimicrobial activities against Staphylococcus aureus
Barut, Burak; Çoruh, Nursen; Department of Biochemistry (2011)
Staphylococcus aureus is one of the major causes of food-borne pathogenesis. Antibiotic consumption for these pathogens has been increasing year by year world-wide. In order to decrease the use of synthetic antibiotics, fresh fruits and dry herbs consumed as beverages in regular diets were examined as potential natural antibiotics for the treatment of food based infections against Staphylococcus aureus. Herbs consumed as tea infusions including Pimpinella anisum L. (anise), Anthemis arvensis L. (camomile), ...
Citation Formats
A. Ergene and B. İçgen, “Meca spesifik DNA probu kullanarak nehir suyunda MRSA izlenmesi,” 2015. Accessed: 00, 2020. [Online]. Available: https://app.trdizin.gov.tr/publication/project/detail/TVRVeU5URXg.