Sitokrom b5'in akciğerlerden saflaştırılması ve b5' in akciğer sitokrom P450' ye bağımlı monooksijenaz enzimleri ile interaksiyonu

1993-12-31
Arınç, Emel
Adalı, Orhan
Başaran, Nilay
Koyun akciğer sitokrom b5'i, deterjan ile çözünürleştirilmiş mikrbzomlardan arka arkaya üç DEAE-selüloz kolonu ve son olarak da Sephadex G-100 ve G-200 kolonu kullanılarak saflaştırıldı. Tavsan karaciğer sitokrom b5'i de, akciğer sitokrom b5'i için kullanılan yöntemler kullanılarak saflaştırıldı, sadece son basamak olarak Sephadex G-75 veya G-100 kolonu kullanıldı. Saflaştırma işlemi, her bir dokuda, iki ayrı sitokrom b5 fraksiyonun elde edilmesiyle sonuçlandı. Koyun akciğer sitokrom b5 fraksiyon l ve fraksiyon 2, mikrozomlara nazaran takriben 340 ve 547.5 defa saflaştırıldılar. Her iki saflaştırılmış koyun akciğer ve tavşan karaciğer sitokrom b5 fraksiyonları SDS-poliakrilamid jel elektroforezinde monomer molekül ağırlığı 16 400 ± 500 olan tek bir protein bandı verdi. Koyun akciğer sitokrom b5 fraksiyon l ve fraksiyon 2'nin benzfetamin N-demetilasyon reaksiyonuna etkisi, saflaştırılmış akciğer sitokrom P450LgM2, sitokrom P450 redüktaz, sentetik lipit ve değişen miktarlarda sitokrom b5 kullanılarak yeniden oluşturulan (rekonstitüte) sistemde incelendi. Akciğer sitokrom b5 fraksiyon l, b5 : P450LgM2 molar oranı 3 : l ve en fazla stimülasyon sistem l'de olmak üzere, bütün sistemlerde benzfetamin N-demetilasyon reaksiyonunu stimüle etti. Akciğer sitokrom b5 fraksiyon 2' de, b5 : P450 molar oranı Tin altında olduğu zaman, bütün sistemlerde, benzfetamin N-demetilasyon aktivitesini artırdı. En fazla stimülasyon, limitli konsantrasyonda P450 redüktaz bulunan ve b5 : P450LgM2 oranı 0.25 : l olan sistem l'de oldu. Akciğer sitokrom b5 fraksiyon 2, molar oran l : l'den fazla olduğu zaman fraksiyon Tin etkisinin aksine N-demetilasyon aktivitesinde inhibisyona sebep oldu. Saflaştırılmış sitokrom b5 kullanılarak immunize edilen tavşanlardan elde edilen 0.2 mg ve 0.4 mg antikorun, NADH-sitokrom b5 redüktaz ve sitokrom bö'e bağımlı akciğer sitokrom £ redüktaz aktivitesini %20 ve %47 oranında inhibe ettiği saptanmıştır. Tiripsin ile kınlan karaciğer ve akciğer apositokrom b5 fraksiyon l ve fraksiyon 2 peptitleri HPLC ile analiz edildiler. Elde edilen peptit haritalarında belirli farklılıklar gözlendi. Bu da sitokrom b5 fraksiyonlarının primer yapılarında bazı farklılıklar olduğunu göstermektedir.

Suggestions

Bone tissue generation on biodegradable polymeric scaffolds
Torun Köse, Gamze; Hasırcı, Vasıf Nejat; Korkusuz, Feza; Department of Biotechnology (2002)
In the present study, tissue engineered bone was produced on calcium phosphate loaded collagen and PHBV8 matrices. Osteoblasts isolated from rat bone marrow were characterized by light microscopy, alkaline phosphatase (ALP) activity, osteocalcin determination assay, and Western blots for integrin. Population doubling time of the cells was found as 50 ± 2 h at 37 °C in a CO2 incubator. PHBV8 foams iiiwere treated with rf-oxygen plasma to modify their surface chemistry and hydrophilicity to increase the reatt...
Mikrosatelit DNA molekül belirleyicileri kullanılarak bitki genotiplerinin tanımlanması
Akkaya, S. Mahinur; Yalın, Sibel Akın(1997)
Bu çalışmada BTD (Basit Tekrar Dizilim) DNA belirleyicileri kullanılarak 16 durum buğdayı kültivarında genetik ilişki tanımlanmış ve bu belirleyiciler ortalama 0.46 değerinde heterozigosite göstermişlerdir. Ayrıca, buğdayda BTD belrleyicileri izole etmek amacıyla BTD belrleyicileri için zenginleştirilmiş genom DNA klonları oluşturulmuştur.
Silikotungstik asit esaslı Katalizörler ile Gliserolün Eterifikasyonu
Sezgi, Naime Aslı(2014-12-31)
Bu çalışmadaki amacımız heteropoli asitlerden olan silikotungstik asit katalizörünün saf ve mezo gözenekli SAPO-34 katalizörü üzerine emdirilerek aktivitelerinin gliserolün isobuten ile eterifikasyon reaksiyonunda test etmektir. Gliserol biyodizel üretiminin önemli bir yan ürünüdür ve gliserolün değerli kimyasallara ya da yakıt alternatiflerine dönüştürülmesi biyodizel üretim prosesinin ekonomisine önemli katkı yapma potansiyeline sahiptir. Gliserolün isobuten ile reaksiyonu sonucunda oluşacak eterlerin üst...
Kronik myeloid lösemide anti-kanser ilaçlara karşı gelişen ilaç dirençliliğinde 15-Lipoksigenaz-1 enziminin rolünün araştırılması
Gündüz, Ufuk(2017-12-31)
Proje kapsamında, bir KML hücre hattı olan K562’de ve bu hücre hattının doksorubisin (K562-DOX) ve imatinib (K562-IMA) dirençli türevlerinde 15-Lipoksigenaz-1 proteinin mRNA ve protein seviyelerinde ekspresyonları kıyaslamalı olarak belirlenecektir. Protein seviyelerindeki olası farklılıkların enzim aktivitesini nasıl etkilediği, literatürde belirtilen (1) yöntemle tespit edilecektir. Daha sonra, protein ekspresyonu az olan hücre hatlarında, dizayn edilecek ekspresyon vektörü yardımıyla proteinin aşırı eks...
Fiber optik kimyasal sensör geliştirilmesi ve atmosferde hidrojen sülfür derişiminin ölçülmesi
Ataman, Yavuz O.; Eroğlu, Emin Ahmet(1994)
Cd(II) tuzlarının sulu çözeltileri ile işleme sokulmuş filitre kağıdı ve benzeri yüzeylerin $H_2S$ içeren gaza maruz kalması sonucu oluşan lüminesans sinyali, $H_2S$ tayini için bir analitik yöntemin aslını oluşturmaktadır. Bu sinyalin oluşmasına etki eden parametreler incelendi. Bu analitik sistemin fiber optik kablolu bir prob ile birlikte kullanılması için deneyler yapıldı. Spektrometreden uzak konumda bulunan filitre kağıtlı sistemde nüve kısmı 940 p,m olan bir kuvars fiber optik kablo ile uyarılan ve y...
Citation Formats
E. Arınç, O. Adalı, and N. Başaran, “Sitokrom b5’in akciğerlerden saflaştırılması ve b5′ in akciğer sitokrom P450′ ye bağımlı monooksijenaz enzimleri ile interaksiyonu,” 1993. Accessed: 00, 2022. [Online]. Available: https://hdl.handle.net/11511/95606.